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實習醫生日記之頑固失眠

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實習醫生日記之—妊娠劇吐

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實習醫生日記之豬蹄腳

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缺失組織蛋白酶抑制劑Stefin B:有利于降低乳腺癌的惡化程度

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摘要:溶酶體組織蛋白酶能夠促進蛋白水解進而加速腫瘤的惡化和轉移蛋白酶的活性由內源抑制劑調節控制組織蛋白酶抑制劑在乳腺癌中到底有哪些作用呢

溶酶體組織蛋白酶(lysosomal cysteine cathepsins)能夠促進蛋白水解進而加速腫瘤的惡化和轉移。蛋白酶的活性由內源抑制劑(endogenous inhibitors)調節控制。組織蛋白酶抑制劑stefin B(Stfb)在乳腺癌中到底有哪些作用呢?德國Albert-Ludwigs-University的C Peters教授和他的團隊針對此項問題進行研究,并于2015年8月發表于Nature雜志。

實驗將Stfb裸鼠與患轉移PyMT乳腺癌的裸鼠雜交。結果顯示,缺失的Stfb的裸鼠的乳腺腫瘤尺寸減小,但是不會對轉移的速度造成影響。Stfb缺失的小鼠腫瘤惡化的減少會同時伴隨死細胞的產生率升高。原發性PyMT腫瘤細胞體外分析與對照組細胞相比,消融的Stfb的表達對增殖,血管再生,轉移的影響不顯著。然而,與溶酶體藥劑Leu-Leu-OMe結合后,缺失Stfb的癌癥細胞更易凋亡。消融的Stfb腫瘤細胞在加大氧化應激時更容易死亡。揭示了體內Stfb在保護癌細胞的促氧化應激性和通過溶酶體途徑誘導細胞凋亡方面的作用。

實驗部分,利用Ki67染色強度對增殖期間過程進行組化分析,CD31染色強度測量的細胞凋亡和腫瘤血管再生速率。

奧地利TissueGnostics公司的TissueQuest軟件對Ki67進行定量分析(20個視野,40倍目鏡)。

缺失組織蛋白酶抑制劑Stefin B:有利于降低乳腺癌的惡化程度

圖中顯示乳腺癌后期的增殖樣本,細胞凋亡和血管密度。

(a)對14周的PyMT;Stfb+/+小鼠和PyMT;Stfb-/-的小鼠利用Ki67的原發性腫瘤檢測。40倍目鏡下的相對屬型影像。

(b)PyMT; Stfb+/+小鼠的Ki67的陽性細胞比例定量分析。

(c)凋亡細胞區域的免疫組化分析。

(d)凋亡細胞區域的比例。

利用HistoQuest 分析軟件對14周的PyMT;Stfb-/-型和PyMT;Stfb-/-小鼠乳腺癌腫瘤組織進行Ki-67染色分析,使用流式散點圖定量分析方式對表達Ki-67的陽性細胞自動計數,統計出Ki-67陽性細胞的比例。

相比傳統的分析方法,HistoQuest更加客觀、精準、高效,并且可以對組織中全部細胞進行分群,對細胞亞群進行再分類、分析。并能夠在組織層面對單個細胞的染色情況進行精確定量,不僅能分析胞漿蛋白,對胞膜、胞核蛋白也能原位定量分析。(生物谷Bioon.com)

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